半胱氨酸-武汉远大弘元-半胱氨酸厂家

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天津工业生物技术研究所研究员刘君带领的微生物生理和代谢工程研究组和研究员江会锋带领的新酶设计与酵母基因组工程研究组进行合作，通过结合代谢工程和蛋白质工程的方法，系统地改造大肠杆0菌，实现了oah的合成。在研究中，首先比较了两种不同来源的高丝氨酸---转移酶(metx)，然后通过敲除竞争和消耗途径基因(meta，metb和thrb)并过表达合成途径基因(thra，metxlm)，实现了oah的积累，其产量达到1.68 g/l。为了进一步提高oah的生产，该研究采用多种代谢工程策略对工程菌株进行进一步改造，包括：敲除赖氨酸竞争途径基因lysa；利用启动子工程调控ppc表达以增强草酰乙0酸的供给；比较不同来源的天冬氨酸激酶，促进前体天冬氨酸的合成等，半胱氨酸厂家，使oah的产量提高至4.69 g/l。然而，中间代谢产物高丝氨酸的大量积累说明其下游途径关键酶metxlm的催化能力是不足的。为了解决这一问题，该研究分别采用基于进化保守性和基于结构信息的蛋白质工程策略对metxlm进行改造，获得的突变体酶活比型提高了12.15倍并受到更少的反馈抑制。通过优化表达metxlm突变体，使工程菌株oah产量达到7.37 g/l。随后该研究通过过表达胞内---coa合成途径，调控胞内nadph的合成，进一步提高oah的合成能力。终获得的工程菌株oah-7在7.5 l发酵罐中经60 h发酵能够生产62.7 g/l的oah，是目前---的0高水平。

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　蛋白质翻译后修饰是调节蛋白质生物学功能的关键步骤，目前已发现的蛋白质翻译后修饰形式多达百种以上。其中---甲0基化是真核生物中广泛存在且进化上保守的翻译后修饰，对蛋白质生物学功能具有十分特殊的调节作用，参与调控种重要的生物学过程。蛋白质---甲0基转移酶(prmt)负责催化---甲0基化，动物中prmt的缺失突变不仅会导致---的生长发育异常，而且与人类遗传---与癌0症的发生密切相关。